可在不同的液體中，包括血清或唾液等復(fù)雜的液體中，對(duì)抗體-抗原相互作用和進(jìn)行動(dòng)態(tài)測(cè)量。
SPR用于抗體的表征
SPR是一個(gè)敏感的平臺(tái)，可以確定抗體或片段與抗原的相互作用，并直接測(cè)量相互作用的親和力和動(dòng)力學(xué)。SPR儀器還可以直接測(cè)量脂質(zhì)體和活細(xì)胞等相關(guān)目標(biāo)分子，并且反應(yīng)其自然狀態(tài)下的相互作用?？梢栽诓煌囊后w中進(jìn)行其相互作用測(cè)量，包括100%的血清，血漿或細(xì)胞生長(zhǎng)介質(zhì)等。SPR提供了抗體的構(gòu)象和方向的一些信息。
選擇SPR用于抗體的表征的優(yōu)勢(shì)
1. 免標(biāo)記的親和力和動(dòng)力學(xué)測(cè)試
2. 低成本
3. 抗體構(gòu)象變化
4. 天然樣品（100%血清）
5. 生物制藥，甚至來(lái)自于細(xì)胞介質(zhì)的藥
6. 簡(jiǎn)單地準(zhǔn)備表面?zhèn)鞲衅?/span>
SPR可以回答的關(guān)于抗體的關(guān)鍵問(wèn)題
1. 抗體與抗原的親和力和結(jié)合動(dòng)力學(xué)參數(shù)
2. 用于免疫分析的最佳抗體是什么?
3. 在脂質(zhì)環(huán)境中與受體結(jié)合最佳的抗體是什么?
4. 在活細(xì)胞中哪個(gè)細(xì)胞信號(hào)是由抗體激活的?
5. 分子X(jué)與Y的結(jié)合和離解動(dòng)力學(xué)有多快?
6. 哪一種單克隆抗體具有最高的親和力?
用SPR測(cè)量的抗體和抗原相互作用
蛋白質(zhì)-抗體相互作用是制藥工業(yè)和蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的重要研究領(lǐng)域。基于抗體的生物技術(shù)藥物已被證明是治療幾種頑固性疾病的有效方法。SPR是決定分子相互作用的靈敏工具。實(shí)時(shí)和標(biāo)簽自由測(cè)量不僅提供了有關(guān)親和力的信息，還提供了研究系統(tǒng)動(dòng)力學(xué)的信息。各種固定的固定協(xié)議可以用來(lái)在傳感器表面上黏合分子，因此方法適用于廣泛的分子。人類(lèi)血清白蛋白(HSA)被固定在羧甲基葡聚糖(CMD)傳感器表面，與胺偶聯(lián)化學(xué)反應(yīng)。測(cè)定了人類(lèi)血清白蛋白抗體(抗HSA)與固定HSA的相互作用。通過(guò)對(duì)四種不同的抗hsa濃度的相互作用，計(jì)算了該結(jié)合的親和力和動(dòng)力學(xué)。正如預(yù)期的抗HhasHSA緊密結(jié)合，復(fù)雜的離解率非常慢。
結(jié)合動(dòng)力學(xué)的抗體
pkc(蛋白激酶c)與癌癥、II型糖尿病和阿爾茨海默氏病有關(guān)。因此，pkc的抑制劑和激活劑有望用于研究和藥物開(kāi)發(fā)。Llama單鏈抗體(VHHs)是一種新的單克隆抗體，可以特別激活或抑制人類(lèi)的pkc。在標(biāo)準(zhǔn)的金傳感器上，羧甲基化的葡聚糖水凝膠是自合成的。用SPR測(cè)量了動(dòng)力學(xué)，并對(duì)SPR進(jìn)行了跟蹤分析。測(cè)量以固定角度模式進(jìn)行。在此過(guò)程中，采用了一階或二階階的朗繆爾綁定模型，并確定了關(guān)聯(lián)和解離常數(shù)。用SPR測(cè)定的pkc激酶的活化和抑制動(dòng)力學(xué)與體內(nèi)的pkca HeLa細(xì)胞的轉(zhuǎn)位有良好的相關(guān)性。結(jié)果表明，將VHHs與pkc構(gòu)象結(jié)合，因此在SPR測(cè)量中，蛋白質(zhì)定位的作用是重要的。
